12º Semana

Finalizamos la técnica de extracción de ADN.
Centrifugamos las muestras, agregamos 0,5 ml de alcohol 70% para lavar el alcohol puro. Centrifugamos nuevamente, descartamos el sobrenadante y agregamos buffer TE a las muestras de ADN.
Preparamos un gel de Agarosa con bromuro de etidio, lo dejamos solidificar. Luego procedimos a sembrar las muestras (10 micro litros de ADN y 4 de loading), colocamos el gel en la cuba cubierta con buffer TBE 1X (previamente preparado), y comenzamos la corrida electroforética para verificar la calidad y cantidad de ADN extraído.
Visualizamos con luz ultra violeta y los resultados obtenidos fueron:
Muestra 1: banda tenue.
Muestra 2: banda gruesa.
Muestra 3: banda tenue.
Muestra 4: no se observa banda.

Se agregó 10 microlitros de RNAsa a cada muestra para purificarla y sacar todo el RNA. Se observa abundante RNA en las tres primeras muestras.

11º Semana

Preparamos una solución de Fenol-cloroformo-Isoamílico (25:24:1). Se lo agregó a las diferentes muestras (cuatro) para la extracción del DNA. Se centrifugó a 13000 rpm durante 5 minutos.
Se transfirió la fase acuosa superior a un tubo con 50 micro litros de Acetato de Sodio 3 M.
Luego le agregamos 1 ml de Etanol puro frío para precipitar el DNA. Lo mezclamos por inversión varias veces, y vimos como se formaba el rulo de DNA.
Lo dejamos en el freezer durante 24 horas para que precipite todo el DNA presente.

10º Semana

Continuamos con la técnica de extracción de levaduras.
A cada una de las cuatro muestras se les agregó 0,5 ml de una solución de lisis que contenía por cada 100 ml:
-20 ml de NaCl 1 M
-20 ml de EDTA 0,5 M
-5 ml de Tris ClH 1 M (pH=8,5)
-55 ml de Agua destilada.
Luego agragamos 5 microlitros de SDS al 10%, 10 microlitros de una solcuión de Proteinasa K (2000 microgramos/ml), y lo dejamos incubar durante una hora, a 65ºC.