jueves, 8 de octubre de 2009

13º Semana

Preparación de los materiales necesarios para la realización de un RAPD. Se preparó una mix con: los siguientes compuestos:
160 microL de Agua, 27 microL de Buffer, Cloruro de Magnesio, 4,5 microL de dNTPs, 27 microL de Primer, 1,8 microL de Taq DNA Pol. Se repartó la mix en 9 tubos (8 muestras y un control negativo). Luego se las colocó en el termociclador para la realización de la RAPD con el siguiente protocolo:
1- 95ºC 120 segundos (Pre-heating)
2- 95ºC 40 segundos (desnaturalización)
3- 50ºC 40 segundos (annealing)
4- 72ºC 59 segundos (extensión)
5- 72ºC 5 minutos (extensión final)
30 ciclos 2, 3 y 4.

Se observó al ultravioleta la corrida con las extracciones, luego de que las muestras fueron tratadas con RNAsa.

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